米氏常数测定时的要求有哪些

时间：2026-02-06 17:24:12来源：

在测定米氏常数（Km）时，需确保实验条件的准确性与稳定性，以获得可靠数据。以下是主要要求：

要求项目	具体说明
酶浓度稳定	酶浓度应保持恒定，避免因酶活性变化影响结果。
底物浓度范围合理	底物浓度应在酶活性可测范围内，通常选择0.1-10倍Km值进行测试。
温度控制	实验温度需恒定，通常为25℃或37℃，以保证酶反应速率稳定。
pH值稳定	溶液pH应保持在酶最适pH范围内，避免pH波动影响酶活性。
反应时间控制	反应时间应处于初速度阶段，避免产物积累干扰测定。
重复性高	每组实验应重复多次，提高数据可靠性，减少误差。

综上，准确测定米氏常数需严格控制实验条件，确保数据真实有效。